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倒置荧光显微镜应注意的细节有哪些

时间:2021-08-25     作者:六维合众

倒置荧光显微镜现在使用起来需要我们了解一些专业知识和物理知识。一般来说我们不需要了解里面的成像原理,但对于倒置荧光显微镜主要部件的作用,当问题出现的时候,我们自己也就能够“启动”进行调整。今天我们就来看看倒置荧光显微镜的使用包括哪些需要注意的细节,大家也可以关注下。


1、正确观察白光的步骤?


将标本放在台上,打开电源开关;将转盘聚光器调整到亮视场,再将环形光圈调整到最大光圈;从低功耗镜像开始。


2.相位差环中的字母BF/PHL/PH2到底是什么意思?


倒置荧光显微镜结合了荧光附件和相差显微镜的特点。那么相位差环中的这些字母分别代表:PHL(40.13),PH1(200.45),PH2(400.6),BF代表白光。因此,如果我们观察荧光,可以选择前三个差异。所谓相位差可以理解为放大了透明结构,因为细胞本身的内部结构是透明的,所以我们想要观察细胞内部结构的时候需要用到相位差。

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3.无论如何调整细焦距螺旋,镜下图像都不清晰。


在这种情况下,镜头可能不干净,故我们就可以用酒精棉擦拭镜子。此外,大功率物镜外还有一个旋钮,适当转动这个旋钮也会使画面清晰。


4.如何正确观察荧光?

关闭室内灯,打开白光电源和汞灯电源。一般需要提前10分钟打开水银灯预热;关闭荧光快门,用低倍镜找到细胞位置;关闭透光按钮,打开荧光光路快门,旋转荧光滤色片转盘;计算机监视器中的观察。


荧光光路快门应在最后面打开,然后先关闭,这样可以保护样品,避免过度的荧光猝灭。


5.水银灯怎么保养?


汞灯在工作时会散发大量的热量,所以需要保持室内温度不要太高,有一个良好的散热环境。水银灯的工作寿命一般为200小时,但使用时间越短,观察越快,水银灯的寿命越长。相反,工作时间越短,汞灯寿命降低的越快,所以开关的数量要尽可能减少。


6.为什么在目镜下观察到的图像只有一半?


出现这种情况的原因是CT回路的调整出现了问题。CT环位于目镜下方,也叫同轴对准目镜,有CT/O/S三种参数设置,CT对应瞄准望远镜的光路;o对应光路中没有物体;s对应光路中的挡光板。那么以上情况就是CT环的螺旋位于CT和S参数之间。


7.白光观察下的物体为什么这么暗?


环形隔膜没有向最大的大孔径开口。环形光阑位于光源和聚光器之间,使光线通过聚光器聚焦在标本上;或者光强调节旋钮关闭。


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